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全自动机械臂固相萃取仪-高效液相色谱法检测水果中阿维菌素残留

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【概述】

       阿维菌素类农药是由链霉菌菌株代谢产生的一种大环内酯类抗生素,主要包括阿维菌素、伊维菌素、依普菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐等,是一类具有高选择性、高杀虫活性的新型农畜两用药。目前广泛应用于蔬菜、水果中菜青虫、潜叶蛾和各种抗性蚜虫等的防治。世界卫生组织将阿维菌素类农药分级为高毒化合物。采用海能全自动固相萃取仪-高效液相色谱法进行检测水果中阿维菌素农药残留,有效的缩短样品中目标物的固相净化所需要的时间,提高了工作效率,也节约了人力;且能精准的控制上样、淋洗、洗脱等溶剂流速,提高了样品目标物的回收率。

【实验/操作方法】

取样

将水果样品用小刀将其切碎,再用组织捣碎机将其捣碎,装入洁净容器内。

提取

称取捣碎后试样约20g于具塞锥形瓶中,加入50mL丙酮,于振荡器上真当30min,用布氏漏斗抽滤,再用20mL丙酮洗涤具塞锥形瓶过过滤的残渣,并重复一次。合并提取液,用氮吹仪定容约2mL。

固相萃取柱净化(C18柱)

表1 固相净化条件

表1 固相净化条件.png

浓缩

用氮吹仪吹至近干,准确加入1。0mL甲醇溶解残渣,再用0。45μm滤膜过滤,待测。

色谱测定条件

色谱柱:ODS-C18,粒径5μm,柱长125mm,内径4。6mm;

流速:1.0mL/min;

检测波长:245nm;

柱温:40℃;

进样体积:20μL。

流动相:甲醇:水=(90+10,V/V),梯度如下表:

定性分析和定量分析

以目标化合物的保留时间定性;以外标一点法定量(即选定峰高相近的标准工作液和样品溶液中阿维菌素响应值,并且在仪器检测线性范围内),并做空白试验(不加样品)。

【实验结果/结论】

计算公式样品中阿维菌素的残留量:image.png

X——试验中阿维菌素残留量,mg/kg;

h——样品中阿维菌素峰高,单位为mm;

hs——标准工作溶液中阿维菌素峰高,单位为mm;

c——标准工作溶液中阿维菌素浓度,单位mg/L;

V——样液最终定容体积,单位mL;

m——最终样液代表的试样量,单位为g。

结论

       采用SPE400全自动机械臂固相萃取仪可以快速对样品提取液进行净化和富集,可做到无人看守、批量处理,省去实验员繁琐的加液取液等人工操作,方便快捷。采用SPE400全自动机械臂固相萃取仪对样品提取液可以精准的控制进样、加液等流速,有利于固相小柱进行萃取分离,从而实现较好的样品检测重复性。

【仪器/耗材清单】

仪器

SPE400全自动机械臂固相萃取仪;HN200多功能氮吹仪;高效液相色谱仪;分析天平;组织捣碎机;振荡器;布氏漏斗;真空泵;其他常规玻璃仪器;滤膜(有机相,0.45μm)。

试剂及耗材

实验用水应符合GB/T6682中一级用水的规格,使用试剂除特殊说明外,均为色谱纯。

丙酮(色谱纯);甲醇(色谱纯);阿维菌素标准溶液:100μg/mL,甲醇作为溶剂。

固相萃取柱:C18,60mg/3ml。

【参考文献】

[1]《GB 23200.19-2016 食品安全国家标准 水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定》[S].

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