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蛋白分析仪蛋白质分析凯氏定氮法

检测各种蛋白质是蛋白分析仪的主要用途,其对于很多疾病的治疗起到重要的作用。其不但对于实验室免疫检测和临床发展的需要有所符合,而且对于流程管理和质量系统的优化也合适。


蛋白质的含量测定

经常需要在蛋白质的分离纯化的过程中进行蛋白质的含量的测定。体液中蛋白质的含量的测定也往往需要用于临床上诊断疾病和观察病程。所以在实际工作中蛋白质含量的测定具有的意义非常的重大。其是测定是蛋白质结构与功能研究的重要基础工具。


凯氏定氮法

介绍

1883年,凯氏定氮法由 Kjeldahl化学家所建立,之后通过不断地进行改良,不断地改进精确性、敏感性和操作的简便程度。目前为止,建立各个具体方法时采用的参考标淮方法依然是凯氏定氮法。


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原理

加热消化生物样品与浓硫酸,其中,硫酸铵由含氮化合物分解并转化,再与氢氧化钠反应释放出氨。使用硼酸吸收释放出的氨,使得硼酸铵生成,再使用标准硫酸滴定,将生物样品中氮的含量求出来。

按照蛋白质平均含氮量为16%,使用氮的含量乘以6.25,就能够将蛋白质的含量计算出来。


优点

对于所有样品的测定都适用是凯氏定氮法的优点。能够在测定动、植物的各种组织、器官以及食品、土壤等成分复杂的蛋白质的含量时被使用。特别是样品溶液浑浊,用其他方法不能测定,可靠的结果能够通过采用凯氏法获得。


缺点

1、和理论含氮量相比,含碱性氨基酸、酰胺和小分子量氨基酸(甘氨酸、丙氨酸等)偏多的蛋白质含氮量明显非常高,导致测定结果偏高。


2、有着相当繁琐的操作过程,要求操作者具有很高的技术熟练度,实验室空气中氨含量会对其产生影响。


3、测定值会由于样品中的非蛋白氮而偏高,所以,在测定前需要先将与样品共存的非蛋白氮去除。


2019-09-29 17:07:07 浏览次数:83次
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